Los pasos a seguir para el correcto envío de muestras son:
1. Preparación de la muestras
5.1.1. Empleo de tubos y placas
Como se ha explicado en el apartado Solicitud de Material, puede enviar sus muestras utilizando como soporte tubos tipos Eppendorf® o placas de 96 pocillos previamente proporcionados por Secugen.
Las placas deben usarse para envíos de 48 o 96 muestras (media placa o placa completa). En el caso de enviar sólo media placa (48 muestras), estás deben ser dispensadas únicamente en las columnas pares o impares, como se muestra en la siguiente figura.
Si se envían menos de 48 muestras para media placa se cobrarán 48 muestras. Lo mismo aplica para las placas de 96, si se envía una placa de 96 para ser procesada de modo completo y la placa tuviera menos de 96 muestras se cobrará la placa completa. Recomendamos que si el número de muestras es mayor de 48 y menor de 96 las que superen las 48 sean enviadas en tubo.
5.1.2. Concentraciones y volúmenes mínimos necesarios
Para su secuenciación se requiere que la muestra enviada tenga un volumen y concentración adecuada de ADN en agua bidestilada.
Si es la primera vez que envía muestras en placa o muestras que requieran ser procesadas en condiciones "especiales" por favor, póngase en contacto con el personal de nuestro laboratorio de secuenciación para que le den toda la información que necesite.
*Nota Importante: Si es la primera vez que va a enviarnos muestras de características especiales (BACs, fragmentos, fagos...) o muestras en placa, le recomendamos que se ponga en contacto con nosotros para que le expliquemos detalladamente la forma correcta de hacerlo.
5.1.3. Tipo de primer
Preparación de muestras para secuenciar con Primers de Secugen
La muestra de ADN a la concentración idónea se dispensará en tubo blanco o placa indicándose el código del primer con el que se quiere secuenciar de la lista que se presenta a continuación:
*Nota Importante: El plásmido de Promega pCI-neo no puede secuenciarse con el oligo T7 promoter debido a un diferencia en la base del extremo 3.' Para este vector utillizar el primer T7 (pCI-neo).
Preparación de muestras para secuenciar con Primers específicos del cliente
En un mismo tubo de color morado o en un mismo pocillo se enviará la mezcla del ADN a la concentración idónea con el primer específico a una concentración de 5 µM, ambos en agua bidestilada.
Volúmenes requeridos:
Para muestras en tubo: 15 ul de ADN + 1,5 ul de primer a 5 µM.
Para muestras en placa: 5 ul de ADN + 0,5 ul de primer a 5 µM.
5.1.4. Preparación de muestras especiales
Si se prevé que la muestra pueda originar dificultades para su secuenciación es importante comunicarlo al personal del servicio para recibir asesoramiento y evaluar el problema.
Junto con los tubos (blancos o morados) o las placas se suministran unos juegos de etiquetas con códigos de barras. Para cada muestra se dispone de tres etiquetas iguales.
Las muestras (tubos o placas), junto las Hojas de Solicitud de servicio se enviarán por correo ordinario o mensajería a temperatura ambiente o se entregarán directamente en Secugen.
Secugen S.L.Puede descargar o imprimir la guía completa de solicitud del servicio de secuenciación de ADN.